اينٽي اوورين (AO) اينٽي باڊي ELISA ڪٽ

هي ڪِٽ انساني سيرم جي نمونن ۾ اينٽي اوورين اينٽي باڊيز (IgG) کي اڻ سڌي طريقي جي بنياد تي ڳولي ٿي، جنهن ۾ صاف ٿيل اوورين جھلي اينٽيجنز کي مائڪرو ويلز کي پري ڪوٽنگ ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي.

ٽيسٽنگ جو عمل انڪيوبيشن لاءِ اينٽيجن-پري ڪوٽيڊ ري ايڪشن ويلز ۾ سيرم نموني کي شامل ڪرڻ سان شروع ٿئي ٿو. جيڪڏهن نموني ۾ اينٽي اوورين اينٽي باڊيز موجود آهن، ته اهي خاص طور تي مائڪرو ويلز ۾ اڳ-ڪوٽيڊ اوورين جھلي اينٽيجنز سان ڳنڍيل هوندا، مستحڪم اينٽيجن-اينٽي باڊي ڪمپليڪس ٺاهيندا. پوءِ ان بائونڊ حصن کي هٽايو ويندو آهي ته جيئن سڃاڻپ جي درستگي کي يقيني بڻائي سگهجي.

اڳيون، هارسريڊش پيرو آڪسائيڊس (HRP) ليبل ٿيل مائوس اينٽي هيومن IgG اينٽي باڊيز کوهن ۾ شامل ڪيون وينديون آهن. ٻئي انڪيوبيشن کان پوءِ، اهي اينزائم ليبل ٿيل اينٽي باڊيز خاص طور تي موجوده اينٽيجن-اينٽي باڊي ڪمپليڪس ۾ اينٽي اوورين اينٽي باڊيز سان ڳنڍيل آهن، هڪ مڪمل "اينٽيجن-اينٽي باڊي-اينزائم ليبل" مدافعتي ڪمپليڪس ٺاهيندا آهن.

آخر ۾، TMB سبسٽريٽ محلول شامل ڪيو ويندو آهي. ڪمپليڪس ۾ HRP TMB سان ڪيميائي رد عمل کي متحرڪ ڪري ٿو، هڪ نظر ايندڙ رنگ جي تبديلي پيدا ڪري ٿو. رد عمل محلول جي جذب (A قدر) کي مائڪروپليٽ ريڊر استعمال ڪندي ماپيو ويندو آهي، ۽ نموني ۾ اينٽي اوورين اينٽي باڊيز جي موجودگي يا غير موجودگي جذب جي نتيجي جي بنياد تي طئي ڪئي ويندي آهي.